铜绿假单胞菌

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  • 所属分类:微生物检验检测类

铜绿假单胞菌的检测

实验原理

控制菌检查法

实验步骤

供试液制备和增菌培养  取供试品,用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲剂,或pH7.2磷酸盐缓冲液,或胰酪大豆胨液体培养基溶解或稀释制成1:10供试液。取相当于1g或1ml供试品的供试液,接种至适宜体积(经方法适用性试验确定)的胰酪大豆胨液体培养基中,混匀,30~35℃培养18~24小时。

选择和分离培  取上述培养物划线接种于溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基平板上 ,30〜35℃培养18〜71小时。

取上述平板上生长的菌落进行氧化酶试验,或采用其他适宜方法进一步鉴定。

氧化酶实验  将洁净滤纸片置于平皿内 ,用无菌玻棒取上述平板上生长的菌落涂于滤纸片上,滴加新配制的1%二盐酸N ,N-二甲基对苯二胺试液,在30秒内若培养物呈粉红色并逐渐变为紫红色为氧化酶试验阳性,否则为阴性。

结果判断  若溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基平板上有菌落生长,且氧化酶试验阳性,应进一步进行适宜的鉴定试验 ,确证是否为铜绿假单胞菌。如果平板上没有菌落生长,或虽有菌落生长但鉴定结果为阴性,或氧化酶试验阴性,判供试品未检出铜绿假单胞菌。




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