控制菌检查法
耐胆盐革兰阴性菌
耐胆盐革兰阴性菌的检测
实验原理
实验步骤
供试液制备和预培养 取供试品,用胰酪大豆胨液体培养基溶解或稀释制成1:10供试液,混匀,在20~25℃培养,培养时间应使供试品中的细菌充分恢复但不增殖(约2小时)。
定性试验
除另有规定外,取相当于1g或1ml供试品的上述预培养物接种至适宜体积(经方法适用性试验确定)肠道菌增菌液体培养基中,30~35℃培养24~48小时后,划线接种于紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基平板上,30~35℃培养18~24小时。如果平板上无菌落生长,判供试品未检出耐胆盐革兰阴性菌。
定量试验
选择和分离培养 取相当于0.1g、0.01g和0.001g(或0.1ml、0.01ml和0.001ml)供试品的预培养物或其稀释液分别接种至适宜体积(经方法适用性试验确定)肠道菌增菌液体培养基中,30~35℃培养24~48小时。上述每一培养物分别划线接种于紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基平板上,30~35℃培养18~24小时。
结果判断 若紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基平板上有菌落生长,则对应培养管为阳性,否则为阴性。根据各培养管检查结果,从表2查1g或1ml供试品含有耐胆盐革兰阴性菌的可能菌数。
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