高效液相色谱仪仿真实训系统

(4.0) 分
  • 所属分类:虚拟仿真类

Agilent 1200系列组件外形设计独特、具有灵活多变的组合方式;卓越的系统性能指标;图形化的工作站友好界面;智能化维护系统和全面完善的法规认证功能,不断创新推出的新组件,完善安捷伦液相色谱的分析领域。

实验原理

1.1 原理

工作时储液瓶中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经样品进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中做相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸得分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱的形式打印出来。

1.2主要技术参数

1.2.1 四元梯度泵可设置的流速范围:0.001-10mL/min

1.2.2 进样范围:0.1100μL,增量为0.1μL

1.2.3 检测器 噪声:在230nm处,<±0.25×10-5AU;漂移:在230nm处,<1×10-4AU/小时;波长范围:190-600nm

1.2.4 柱温箱控温范围:室温下10 - 80℃,带降温功能;

1.3使用环境

室内照明要光线适中,避免阳光直射。应注意仪器室的通风,以排除室内有害气体、保持空气清新。
一般要求室温在2030℃之间,日温度变化23℃,不要波动太大,否则,在开机分析时会影响色谱分离;室内相对湿度应控制在60%以下。必须要保证稳定的输人电压,为此,建议色谱室应设有和仪器负荷相当的稳压电源。室内墙上应安装有接地电阻符合要求的地线,还要注意保持室内清洁。

2. 适用范围

此文件适用于成都普思生物科技股份有限公司分析测试中心Agilent1260 HPLC的操作和维护保养。


实验步骤

一.开机前准备 

  a、明确实验目的,检测样品的性质,选择相应的分析色谱柱;

 b、配制分析的样品和流动相,选用色谱纯流动相或用0.22 μm的过滤膜过滤,样品也可10000rpm离心10min。

c、检验仪器和计算机的电源线,数据线是否连接完好。

 

二.开机 

 a、打开计算机的电源,待计算机运行完全后; 

 b、依次打开脱气机、泵、柱温箱、检测器的电源开关;

 c、待仪器自检完成后,双击桌面上的“Instrument 1 online 在线”图标,打开工作站。

 

三.样品分析


1.溶剂替换与系统平衡 

 a、配制好的流动相到入溶剂瓶中,并在化学工作站上修改倒入的流动相体积;

 b、逆时针转动A/B/C/D泵的排液阀,打开排液阀;设流速为5ml/min,按[pump]键,冲洗5min后再按[pump]键停泵,将排液阀顺时针旋转到底,关闭排液阀,如管路中仍有气泡,则重复以上操作直至气泡排尽;

 c、在柱温箱中连接上分析柱,根据分析柱所承受的压力设置平衡流速,替换分析柱的保存液。

 2.编辑方法 

 a、在Instrument online主界面上选择Method→Edit Entire Method; 

 b、根据提示编辑完所有的参数设定合适的泵流量和检测器波长;

 c、保存所编辑的方法。   

 3.样品采集与分析 

 a、在Method & Runcontrol界面上选择上选择File→Load→Method,选择分析方法文件;

 b、单针进样:在Method & Runcontrol界面上选择Runcontrol → Sample Infomation,依提示输入保存路径、文件名称、样品名称、操作者等信息,进样时同时按工作站面板上的Start键,即开始样品分析与数据采集; 

 c、多针进样:在Method & Runcontrol界面上,选择Sequence→Sequence table,输入进样位置、样品名称、分析方法、进样次数、进样量及样品信息等;将准备好的样品置于自动进样器上,选择Runcontrol →Run Sequence,即开始多个样品分析与数据采集。     

 4.报告输出与编辑 

 a、在Instrument online主界面上选择View → Data Analysis,进入 Data Analysis界面; 

 b、选择所要处理的数据文件; 

 c、选择所要选用的报告格式,输出报告。 

 

四.关机 

 a、分析结束后,点击检测器图标,选择control→off,关闭分析紫外灯; 

 b、选择合适的流动相,冲洗泵,进样阀,分析柱和检测器; 

 c、依次关闭化学工作站,仪器各个模块电源和计算机电源。 

 

五.注意事项    

 a、多相流动相分析时,含盐流动相在上(A、C相),有机相在下(B、D相);    

 b、水相置于棕色溶剂瓶中,每次使用都要换成新鲜的溶液,防止长菌。    

 c、仪器运行时,泵头必须用10%异丙醇水溶液虹吸冲洗,不能干涸。


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